Nationales Referenzlabor für Geflügelpest (AI)
Institut für Virusdiagnostik
Aquatisch lebende Wildvögel stellen das wesentliche Reservoir aller in der Natur vorkommenden Influenza A Virussubtypen dar (aviäre Influenza, AIV: derzeit 16 H und 9 N Subtypen). In diesem Wirtspool perpetuieren AI Viren in der Regel ohne größere klinische Auswirkungen auf ihre Wirte. Entsprechende Expositionsmöglichkeiten sowie Dispositionen auf Wirts- wie auf Virusseite vorausgesetzt, sind jedoch auch Übergänge aus diesem Reservoir auf Hausgeflügel und auch auf Säugetiere - den Menschen eingeschlossen - möglich. Viren der Subtypen H5 und H7 können in Hausgeflügel spontan zu einer hochpathogenen Form mutieren (hochpathogene aviäre Influenzaviren, HPAIV), die die eigentlichen Erreger der Klassischen Geflügelpest darstellen. Die Klassische Geflügelpest verläuft besonders in Hühner- und Putenbeständen mit sehr hohen Verlustraten und ist daher weltweit von großer wirtschaftlicher Bedeutung. HPAIV können, bei Exposition gegenüber einer hohen Infektionsdosis, auch auf den Menschen übertragen werden und dort tödlich verlaufende Erkrankungen auslösen. Vorbeugung und Bekämpfung der Klassischen Geflügelpest sind durch die Geflügelpestverordnung bundeseinheitlich gesetzlich gemaßregelt. Hierbei liegt das Hauptaugenmerk auf Biosicherheitsmaßnahmen, die das Entstehen und die Verbreitung der Erreger in Hausgeflügelhaltungen verhindern sollen. In dieses Konzept sind auch ausgedehnte Monitoringuntersuchungen bei Wildvögeln und Hausgeflügel eingebunden. Der infektiologischen, spezifischen Diagnostik fällt dabei eine entscheidende Bedeutung zu.
Das NRL für AIV fungiert als direkter Ansprechpartner und Referenzzentrum für Behörden des Bundes und der Länder, vor allem in Fragen der Diagnostik und ist auch im europäischen Verbund der Nationalen Referenzlabore aktiv. Als Referenzlabor der Weltgesundheitsorganisation für Tiere (O.I.E.) steht das Labor auch für Beratungen und diagnostische Hilfestellungen außereuropäischen Ländern zur Verfügung. Das Labor betreibt anwendungsorientierte Forschung auf dem Gebiet der AIV-Diagnostik, Epidemiologie und Pathogenese.
Leistungsübersicht
Diagnostik
- Virus-, Antigen- bzw. Genomnachweis in Untersuchungsmaterial von Geflügel, Wildvögeln und Schweinen
- Identifizierung von aviären und porcinen Influenza-Virusisolaten
- Charakterisierung der Pathogenität aviärer Virusisolate durch Bestimmung des intravenösen Pathogenitätsindex und/oder Sequenzierung der Spaltstelle des Hämagglutinins
- Identifizierung von Influenza-A-Viren der Subtypen H5 und H7
- Bestimmung des Hämagglutinin- und des Neuraminidase-Subtyps von Influenza-A-Isolaten
- Untersuchung von Geflügel- und Wildvogelseren auf Antikörper gegen Influenzavirus insbesondere vom Subtyp H5 und H7
Betreuung und Überwachung
- Koordinierung der in den regionalen Untersuchungsämtern angewandten Diagnoseverfahren
- Asservierung von Virusisolaten aus bestätigten Seuchenfällen und Übergabe ausgewählter Isolate an das EU-Referenzlabor
- Sammlung und Konservierung von Referenzvirusstämmen, Antigenen und Antiseren
- Teilnahme an EU-Ringtesten
- Durchführung nationaler Laborvergleichsuntersuchungen (Ringtest)
Beratung
- Direkter Ansprechpartner für Bundes- und Landesbehörden zu Fragen der AI-Diagnostik und Bekämpfung
- Beratertätigkeiten für O.I.E., FAO und WHO bezüglich aviärer Influenzavirusinfektionen
- O.I.E. Twinninglabor für Nationales AI-Referenzlabor Ägyptens
Forschung
- Beteiligung an Arbeitsgruppen und Forschungsprojekten der Europäischen Union
- Forschungsarbeit zur Weiterentwicklung und Standardisierung der AI-Diagnostik sowie zu Fragen der Pathogenese oder Immunisierung und zum Vorkommen von Influenzaviren bei Wildvögeln
Methodenübersicht
Die im NRL für AI angewendeten Standard-Diagnostikverfahren sind in den aktuellen „Arbeitsanleitungen zur Diagnose anzeigepflichtiger Tierseuchen“ (Herausgeber: BMELV) aufgeführt. Im einzelnen werden folgende Methoden durchgeführt:
- Virusisolierung im bebrüteten Hühnerei
- Genomnachweis mit PCR
- Bestimmung des Hämagglutinin-Subtyps mittels Hämagglutinations-Hemmungstest (HAH), PCR/Sequenzierung sowie DNA-Chip
- Pathogenitätsbestimmung durch Sequenzierung der Spaltstelle des Hämagglutinins und/oder Bestimmung des intravenösen Pathogenitätsindex (IVPI)
- Bestimmung des Neuraminidase-Subtyps mittels PCR, DNA-Chip sowie Neuraminidase-Hemmtest
- Nachweis von Antikörpern gegen Influenzaviren mittels ELISA
- Nachweis von Antikörpern gegen AIV Subtypen H1 bis H16 mittels HAH sowie Subtypisierung von Antikörpern
- Nachweis neutralisierender Antikörper gegen Influenzaviren
Forschungsprojekte
- Charakterisierung antigener Driftvarianten ägyptischer HPAIV H5N1
- FluLabNet (EU FP6)- Aufbau und Pflege eines diagnostischen Netzwerkes europäischer Referenzlabore für aviäre Influenzaviren
- Vaxxiflu – Untersuchungen zur Beteiligung von Influenza A Viren an Fruchtbarkeitsstörungen bei Sauen
Bericht zum Stand 1. Juli 2011
Aktuelles aus dem Referenzlabor
Ringversuche 2011
Das NRL AI wird in diesem Jahr wieder einen Ringversuch auf nationaler Ebene durchführen. Die Kernzielgruppe sind die Untersuchungseinrichtungen der Bundesländer. Weiterhin können diagnostisch arbeitende Labore der Universitätsinstitute teilnehmen, private diagnostische Laboratorien sowie Labore anderer Bundesbehörden. Der Ringversuch wird gemeinsam mit dem NRL ND durchgeführt und umfasst Proben zur Untersuchung mittels PCR, klassischer serologischer Verfahren sowie zur Virusisolierung.
Teilnehmer des letzten durchgeführten Ringversuchs werden automatisch angeschrieben. Weitere Interessierte melden sich bitte per e-mail: timm.harder@we dont want spamfli.bund.de.
Zum Download:
Darüberhinaus führt das NRL AI in diesem Jahr gemeinsam mit dem National Veterinary Services Laboratories Diagnostic Virology Laboratory (APHIS, Ames, Iowa) des United States Department of Agriculture im Auftrag der Influenza-Organisation (OFFLU) der OIE und FAO einen Ringversuch für das globale Netz der AI Referenzlabore der OIE und FAO durch.
Im Rahmen der OIE Twinning Partnerschaft des NRL AI mit dem Nationalen AI Referenzlabor Ägyptens wird auch ein Methodenabgleich verbunden mit einem Ringversuch mit amtlichen diagnostischen Laboratorien in Ägypten organisiert.
Wildvogel- und Hausgeflügelmonitoring
Die Untersuchungen im o. g. Programm werden gemäß dem durch die EU genehmigten und kofinanzierten Monitoringplan auch 2011 fortgesetzt. Zentrale Datendrehscheibe für die Ergebnisse bleibt die AI-Wildvogeldatenbank, deren Strukturen und Werkzeuge durch die Kollegen des Institutes für Epidemiologie, FLI Wusterhausen, weiter den Bedürfnissen angepasst wurden. Im Gegensatz zu den Vorjahren wird jedoch die Untersuchung von lebend beprobten Wildvögeln nicht mehr durch die EU kofinanziert. Das Monitoring konzentriert sich daher auf tot aufgefundene Wildvögel. Diese Form der Surveillance begünstigt den Nachweis von hochpathogenem Influenza A Virus.